常见的RNA提取方法

2023-12-10

不同组织RNA提取原理是将细胞裂解,释放出 RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA 等杂质,最终获得高纯度 RNA 产物的过程。那么你知道常见的RNA提取方法有什么吗?让我们一起来看看吧!

一、酚氯仿抽提(有机试剂抽提)

原理:将被裂解的生物样本,混匀离心分相以后,RNA在上层水相,DNA,蛋白质在中间层,下层有机相。收集水相加入乙醇或异丙醇可沉淀RNA,漂洗后得到RNA

优点:得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在内的总RNA

缺点:用到苯酚、氯仿等有毒试剂。

二、硅胶柱法抽提

原理:硅基质材料在一定的高盐缓冲系统下高效、专一地吸附核酸。(高盐低pH吸附核酸,低盐高pH释放核酸。

优点:操作简单、安全无毒

缺点:需配合高速离心机使用;提取的总RNA不含小于200nt的小RNA

三、磁珠法抽提

原理:纳米微球磁珠材料表面涂上一层二氧化硅,使磁珠获得吸附能力。

优点:磁场中快速分离,无需离心,可实现自动化操作。

缺点:成本较高;提取的RNA可能残存磁珠。

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