SIM SF 培养基

简要描述：SIM SF 培养基为澄清淡黄色透明液体，如果一旦发现培养基变得浑浊或出现沉淀，请勿使用。

金山科研平台微信：jinshanbio

培养基特点：

SIM SF 培养基为澄清淡黄色透明液体，如果一旦发现培养基变得浑浊或出现沉淀，请勿使用。

保存条件：

2~8℃避光保存，一旦过期，请勿使用。

稳定性及保质期：

室温下一个星期内稳定。

自收到之日起， 2~8℃避光保存，六个月内稳定。

细胞冻存：

选择处于对数生长期的细胞，保证活率大于90%。

制备细胞冻存液：45%新鲜培养基，45%条件培养基，10%DMSO。

200g离心5分钟，弃去上清。

用细胞冻存液重悬细胞，细胞冻存密度为1.2~2×107/ml/ml。

迅速转移重悬的细胞至无菌的冻存管中，每管1~2ml。

将冻存管放入程序降温盒中，-70℃冰箱放置过夜。

若冻存细胞需要长期保存，将其转移至液氮罐中。

细胞复苏：

将冻存管迅速转移至27℃水浴中，进行融化。

将融化的细胞转至无菌的含5-10ml新鲜培养基的无菌离心管中。

200g低速离心5分钟，缓慢倒掉上部培养基，不要将沉降的细胞悬起。

用10-20ml新鲜培养基重悬细胞，确保重悬后的细胞密度大于1×106/ml左右。

将重悬的细胞放入无菌培养瓶中，旋盖拧松，放在摇床中悬浮培养。

当细胞密度生长达到2~4×106/ml时，可以进行传代，传代时细胞接种密度为0.8-1×106/ml。