EZBioscience microRNA加尾法逆转录试剂盒
简要描述:EZBioscience microRNA加尾法逆转录试剂盒在一步分析中使用了Poly(A)拖尾反应和逆转录反应的方法来合成miRNA的第一链cDNA。通过使用大肠杆菌聚(A)聚合酶通过添加聚(A)延伸成熟转录本的3末端来修饰总RNA中的成熟miRNA。然后,使用Oligo(dT)通用标签引物对修饰的miRNA进行通用逆转录,以合成所有miRNA的第一条链cDNA。
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一、试剂盒简介
EZBioscience microRNA加尾法逆转录试剂盒在一步分析中使用了Poly(A)拖尾反应和逆转录反应的方法来合成miRNA的第一链cDNA。通过使用大肠杆菌聚(A)聚合酶通过添加聚(A)延伸成熟转录本的3末端来修饰总RNA中的成熟miRNA。然后,使用Oligo(dT)通用标签引物对修饰的miRNA进行通用逆转录,以合成所有miRNA的第一条链cDNA。该试剂盒可与microRNA探针qPCR试剂盒(目录号:EZB-miProbe/EZB-miProbe-R0/EZB-miProbe-R1/EZB- miProbe-R2)一起使用。
该试剂盒包含三管试剂:gDNA去除剂,miRNART酶混合物和4xmiRNART缓冲液。
其中,gDNA去除剂主要包括浓缩的DNase和缓冲液。它可以降解超过95%的残留基因组DNA,仅需在室温(19~27℃)下反应5分钟即可,从而大大降低了对结果的干扰。
miRNART酶混合物主要包含大肠杆菌Poly(A)聚合酶,逆转录酶和RNase抑制剂。大肠杆菌Poly(A)聚合酶不仅具有高效的Poly(A)拖尾反应效率,而且可以特异性识别成熟的单链miRNA,从而避免了具有双销结构的miRNA前体的逆转录反应。具有很强的抗干扰能力和放大能力。
4xmiRNA RTBuffer试剂包含电+Polv(A)拖星反应和逆转录反应的所有原材料和引物包括Olipo(dT)
通用标签引物,缓冲液和dNTPs,并且经过仔细优化以确保Polv(A)高效地进行拖尾反应和逆转录反应。
二、产品组分
三、保存条件
-20℃保存
四、EZBioscience microRNA加尾法逆转录试剂盒特点
1加尾法一步快速高效率将所有miRNA逆转录为可直接检测的cDNA。
2.无需设计miRNA特异性引物,仅需30分钟即可完成microRNA的逆转录,简单高效率。
3.需要与EZB-miProbe-Ro.EZB-miProbe,EZB-miProbe-R1EZB-miProbe-R2配套使用。
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