EZBioscience 一步法升级版试剂盒
简要描述:EZBioscience 一步法升级版试剂盒,for microRNA直接用于从培养的细胞裂解物中快速方便地进行逆转录。首先在细胞裂解缓冲液中裂解细胞以释放微小RNA。然后,用gDNA去除剂处理细胞裂解液,以消除污染的基因组DNA。最后,聚腺苷酸化和逆转录在同一反应系统中一步完成。
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一、试剂盒简介
EZBioscience 一步法升级版试剂盒,for microRNA直接用于从培养的细胞裂解物中快速方便地进行逆转录。首先在细胞裂解缓冲液中裂解细胞以释放微小RNA。然后,用gDNA去除剂处理细胞裂解液,以消除污染的基因组DNA。最后,聚腺苷酸化和逆转录在同一反应系统中一步完成。
EZBioscience 一步法升级版试剂盒,for microRNA包含6管试剂:细胞裂解缓冲液,gDNA去除剂,miRNART酶混合物,4xmiRNART缓冲液,正向U6引物和通用aPCR反向引物(Universal3'aPCR引物),可用干所有miRNA的定量检测。因此,aPCR反应仅需要每个靶标miRNA的特异性正向引物。
miRNART酶混合物主要包含大肠杆菌Poly(A)聚合酶,逆转录酶和RNase抑制剂。其中,大肠杆菌Poly(A)聚合酶不仅具有添加poly(A)尾部的高效率,而且可以特异性识别单链成熟miRNA,从而避免了具有双链结构的miRNA前体的进一步逆转录反应。M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力和扩增能力,并且扩增效率特别好。
4x miRNA RT Buffer包含用干miRNA聚腺苷酸化和逆转录反应的所有原材料和引物,包括Oligo(dT)通用标签引物,缓冲液和dNTPs,并经过精心优化,以确保多腺苷酸化和逆转录同时有效地进行。
二、产品组分
三、保存条件 -20℃保存
四、试剂盒特点
无需提取RNA,直接裂解细胞,裂解产物经过一步法快速高效的加尾、逆转录得到可用于qPCR检测的所有 miRNA的cDNA。
30分钟即可得到针对所有miRNA的cDNA,适用于5000个~50万细胞的miRNA快速检测。
后续cDNA仅用于探针法检测,需要与EZB-miProbe-RO、EZB-miProbe,FZB-miProbe-R1,EZB-miProbe-R2配套使用。
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