原代食管癌*培养基

简要描述：原代食管癌*培养基（Human Esophaqus Carcinoma Cell Medium）是一种为促进食管癌原代细胞体外生长而设计的培养基。

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产品名称：原代食管癌*培养基（Human Esophagus Carcinoma Cell Medium）产品说明：原代食管癌*培养基（Human Esophaqus Carcinoma Cell Medium）是一种为促进食管癌原代细胞体外生长而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系，在5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时，pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个理想平衡的营养环境，选择性地促进体外人食管鳞癌原代细胞的生长。产品优势：(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明◉使用前准备（1）DMEM/F12培养基稀释后的基质胶（Corning#356231）（100倍稀释）。（2）15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。（3）提前30min从4℃冰箱取出*培养基平衡至室温。◉食管癌原代细胞培养（1）至少提前半小时使用稀释后的基质胶预铺培养瓶/板，使用前吸干基质胶，用稀释液润洗一遍。（2）将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO2条件培养。（3）原代细胞初次接种后2-3天内勿动（利于细胞贴壁），第一次换液建议换半液。◉食管癌原代细胞传代（1）镜下观察细胞形成克隆，且汇合度达到80~90%时即可传代。（2）培养箱中取出细胞，弃旧培养液，加入适量0.05%胰酶，37℃孵育，5min后拿出轻拍培养瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。（3）细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用终止培养基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500rpm离心3 min。（4）弃上清，以1-2mL*培养基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5% CO2条件培养。注意事项：1.本产品在使用前需平衡至室温。2.用产品时应注意无菌操作，避免污染。3.本产品中不含血清，含原代细胞专用抗生素，无需额外添加抗生素。4.为保持本产品的理想使用效果不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。5.请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。6.样本需为食管鳞德术中样本，且肿瘤细胞比例越高（至少>50%），培养成功率越高，不推荐用于少量样本（如内镜和循环肿瘤细胞）的培养。7.本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。