胎牛血清是一种常用的细胞培养基添加剂,通常用于增强细胞的生长和增殖能力。那么你知道胎牛血清在使用过程中的注意事项有哪些吗?让我们一起来看看吧!
一、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损
血清解冻时应将血清从-15~-70℃的低温冰箱中取出放入4℃冰箱解冻1天,待全部解冻后再分装。解冻过程中请不时摇匀(小心勿造成气泡),使血清成分和温度均匀,从而减少沉淀的产生。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻,并避免反复冻融。需要长期保存的血清必须储存于-20℃到-70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会被破坏,而影响血清质量。
二、有时在血清中见到的絮状沉淀可能是些什么物质
主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用400 xg离心5 min去除,也可不用处理。
三、如何避免血清中产生沉淀
(1) 解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
(4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
(5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,无须做此步骤。
(6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
四、热灭活对血清的作用是什么
热灭活步骤能够灭活补体系统。补体会参与以下事件中:溶解细胞事件,平滑肌收缩,肥大细胞与血小板释放组胺,吞噬作用增强,趋化作用,淋巴细胞与巨噬细胞的活化等。
五、加到培养基中的血清必须灭活吗
不是必须的,看做什么实验。如果用于培养普通细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞,如内皮细胞,血清是需要灭活,一般是56℃,30min。
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