流式细胞术在科研方面有哪些应用?

2023-12-10

流式细胞术(FCM)是一种对处在快速流动中的细胞或其它生物微粒逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。它集计算机技术、激光技术、流体力学、荧光标记技术、单克隆抗体技术、细胞免疫学于一体,按照细胞或生物颗粒的物理或化学性质,同时具有分析和分选细胞或生物颗粒的功能。

流式细胞术在科研方面有哪些应用?让我们一起来看看吧!

一、细胞凋亡检测

在正常细胞中,细胞膜上的磷脂酰丝氨酸(PS)位于胞浆侧。细胞凋亡中期,PS 外翻。Annexin V 是一种 Ca2+ 依赖的对 PS 具有高度亲和力的磷脂结合蛋白,因此可以用荧光标记的 Annexin V 检测 PS 的外翻。凋亡末期,细胞膜结构受损,原本不透膜的核酸染料(如 PI、7-AAD 等)也能进入细胞,从而产生信号。分别检测 Annexin V 和不透膜核酸染料的信号,可对凋亡中期和末期细胞的比例进行定量。

二、细胞周期检测

细胞核 DNA 含量随着细胞增殖周期时相的不同而发生变化,用 DNA 染料进行染色,DNA 含量多,荧光信号强,DNA 含量少,荧光强度低。通过对细胞瞬间的快速测定,判断细胞所处的细胞周期时相,并分析群体细胞中处于不同周期时相的细胞比例,以研究细胞的周期,DNA 复制和染色体倍性等。在肿瘤学研究中尤其常用,可以此来判断药物对肿瘤细胞影响、肿瘤的生长速度与患者预后等。

三、Th/Treg检测

通过刺激阻断剂对 T 细胞进行处理,通过检测表面或胞内标志物进行分型检测。

四、免疫分型检测

利用细胞表面或细胞内特异性抗体分子,分别选用不同标记的流式抗体对细胞进行分型和分析。

利用抗原/抗体反应原理,采用不同的流式抗体对样本进行检测可达到对不同细胞进行分型检测的目的。
五、细胞因子检测
采用 CBA 或液相芯片的方法将捕获抗体和微球/液相芯片结合,检测抗体和 SA-PE 结合通过抗原抗体特异性反应达到多种细胞因子检测的目的。
六、细胞分选
细胞分选利用流式细胞分选仪来分离纯化细胞或颗粒以供进一步分析。
七、其他
其他还包括死/活细胞检测、线粒体检测、外泌体检测。
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