AAT Bioquest公司7-AAD核酸染料使用说明

产品描述

7-Aminoactinomycin D，简称7-AAD，是一种核酸染料，与DNA结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI相似，可被488nm氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的*替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。

另外，7-AAD是一种非渗透性荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞仪。

运输和保存方法

室温运输，-20℃干燥避光保存。

注意事项

1）7-AAD为潜在致癌物质，操作时请穿戴手套、眼罩以及其他防护措施，以避免接触皮肤。

2）玻璃器皿上残留的去垢剂也会影响染色的效果，导致细胞存在或不存在都会出现强荧光。玻璃器皿的清洗应用去垢剂，然后用自来水冲洗数遍后，用去离子水或蒸馏水漂洗。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

AAT Bioquest公司7-AAD核酸染料使用说明

【注】：该操作说明适用于大多数细胞，但不同的细胞类型、细胞密度、使用的培养基以及其他一些因素都有可能影响染色效果，本说明仅供参考。

储存液的制备：取适量DMSO加入到7-AAD配制成1-10mM，该储存液可分装于-20℃稳定保存6个月。

根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。

离心收集细胞，并用合适的的缓冲盐溶液或者培养基(pH=7.4)重悬细胞。

加入适量7-AAD染色液，推荐该染料的工作浓度为0.5-5µM，孵育15-60min。

【注】：实验建议在推荐的工作浓度范围内设置浓度梯度检测，从而摸索*的染色浓度。

根据其激发发射波长（Ex/Em=545nm/650nm）在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。