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烟酸测定用培养基

货品名称：烟酸测定用培养基 英文：Niacin Assay Medium 品牌：印度HiMedia 货号：M040 品牌：HiMedia 用途：微生物法测定食品中的烟酸或烟酸胺

原理

微生物法测定食品中的烟酸或烟酸胺需要三种培养基，烟酸测定用培养基、接种培养基（相当于国标中的乳酸杆菌肉汤培养基）以及菌种维持培养基（相当于国标中的乳酸杆菌琼脂培养基）。

烟酸测定用培养基采用植物乳杆菌（ATCC 8014）为测定用菌，标准曲线采用美国药典推荐的浓度梯度（5），即0.0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 、0.25μg/10ml/管。烟酸测定用培养基可用于浊度和酸度分析。浊度分析时在35-37°C 培养16-18小时后进行。酸度分析是在35-37°C培养72小时后进行。

烟酸测定用培养基不含烟酸，但包含所有植物乳杆菌（ATCC 8014）培养所需的必要营养和维生素。添加特定浓度的烟酸会对应测定菌相应的生长，能用浊度法和酸度滴定法测量。

应用

烟酸测定用培养基推荐用于以植物乳杆菌（ATCC 8014）为测定用菌的微生物法检测烟酸或烟酰胺。

质量控制

Ø外观——米黄色至黄色均一自由流动粉末

Ø制备好的培养基颜色和澄清度——淡琥珀色透明溶液，可能有轻微沉淀

Ø配比浓度——在25°C下7.51%w/v(7.51g/100ml水）水溶液，pH值为6.8±0.2

ØpH值——6.60-7.00

配置

称取7.51g干粉培养基溶于100ml蒸馏水。必要时加热使培养基完全溶解。混匀，使轻微的沉淀均匀分布。检测时，每管加入5ml培养基（包含浓度梯度标准品和未知样品）。补足蒸馏水，使总体积达到10ml。高压消毒15磅121°C 10分钟。立即冷却，通常每管(10 ml)烟酸或烟酸胺水平为0.0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 、0.25μg时，可获得满意结果。

培养反应

采用植物乳杆菌（ATCC 8014）微生物法测定烟酸，35-37°C孵育16-18小时。

随着标准品烟酸浓度递增（0.0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2、0.25μg/管)，测定菌生长随之增加，620nm吸光度逐渐升高。

文献

1.Snell and Wright, 1941, J. Biol. Chem. 13:675.

2.Krehl, Strong and Elvehjem, 1943, Ind. & Eng. Chem., Ann. Ed. 15:471.

3.Barton-Wright, 1944, J. Biochem., 38:314.

4.Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 19th Ed., AOAC,Washington, D.C.

5.The United States Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States Pharmacopoeial Convention, Rockville, MD.